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還原型(GSH)檢測試劑盒2

簡要描述:產品概述 product description GSH是一種低分子自由基清除劑,它可清除O2-、H2O2、LOOH。還原型是蛋氨酸、和半組成的一種小分子肽,是組織中主要的非蛋白質的巰基化合物,并且是GPX和GST兩種酶類的底物,為這二種酶分解氫過氧化物所必需,并且能穩定含巰基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷。最近還證明GSH也參與使VE恢復到還原態的作用。GSH在防止動脈粥樣硬化、冠心病、防衰老、抗腫瘤、防老年性癡呆等疾病的預防、恢復、治療的研究過程中起到重要參考作用。 還原型(GSH)可與二硫代*甲酸(DTNB)反應,生成一種黃色化合物,可在405nm下比色定量測定還原型(GSH)含量。 本試劑盒測僅用于科研領域,不可用于臨床診斷或其他用途。 貝博®......

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-12-22
  • 訪  問  量:377

詳細介紹

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個月
檢測方法
微孔板,酶標儀
適用樣本
血清血漿/全血/組織
產品應用
微孔板,酶標儀
儀器準備
1.酶標儀
2.離心機
試劑準備
1.雙蒸水
耗材準備
1.一次性手套
2.吸頭
使用注意事項
1.血液中的GSH幾乎全部存在于紅細胞內,可以用每升全血中GSH的克數來表示,也可用每克Hb中GSH含量來表示;
2.計算時應用消光系數,故比色計要校正波長。用標準管計算較方便、準確;
3.吸取上清時,用帶刻度的5ml滴管,或者移液器,避開表面的一層薄膜,插到上清液中吸取2ml做顯色反應;
4.每批實驗做2個標準管、空白管,以減少操作誤差;
使用方法
試劑工作液配制 :
1. 試劑A為過飽和溶液,如有結晶,則取上清使用;

2. GSH標準溶劑工作液:
溶劑儲備液:雙蒸水=1:9稀釋,即為GSH標準溶劑工作液,現用現配。

3. 1mmol/LGSH標準溶液的配制:GSH分子量為307,每次測定前將3.07 mg的GSH標準品加到10mlGSH的溶劑工作液中,混勻,現用現配。

4. 20μmol/LGSH標準溶液的配制:取1mmol/LGSH標準溶液0.2ml加GSH標準溶劑工作液9.8ml,現用現配。

樣本的前處理:
1. 培養細胞:將收集好的細胞,用PBS清洗1~2次,低速離心收集沉淀細胞,再加入0.3-0.5ml 0.1M pH7.4的等滲PBS緩沖液重懸細胞,超聲或手動研磨破碎細胞后待測;
上清液制備:
取破碎后的細胞懸液0.1ml,加0.1ml試劑A混勻,3500轉/分離心10分鐘, 取上清液1ml待測;

2. 血清(漿):取0.05ml,加試劑A0. 2ml混勻,3500轉/分離心10分鐘, 取上清液待測;

3. 全血樣本的處理:1:9溶血液的制備:取0.1ml肝素抗凝全血加雙蒸水0.9ml,充分混勻,直至透亮為止;
上清液制備:取0.05ml,加試劑A0. 2ml混勻,3500轉/分離心10分鐘, 取上清液待測;

4. 組織樣本:10%勻漿液的制備:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9比例加入9倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500轉/分,離心10min,取上清液待測;
上清液制備:取0.1ml,加0. 1ml試劑A 0. 1ml混勻,3500轉/分離心10分鐘, 取上清液待測;


計算:

(1)全血計算公式:
全血中GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x 樣本前處理 x 樣本測定前
(umol/L) 標準OD值 - 空白OD值 (20umol/L) 稀釋倍數(5倍)稀釋倍數(10倍)

(2)細胞及組織計算公式:

GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x樣本前處理 ÷ 待測勻漿蛋白
(umol/gprot) 標準OD值 - 空白OD值 (20umol/L) 稀釋倍數(2倍) 濃度(gprot/L)

(3)血清(漿計算公式)

GSH含量 = 測定OD值 – 空白OD值 x 標準品濃度 x樣本前處理
(umol/L) 標準OD值 - 空白OD值 (20umol/L) 稀釋倍數(5倍)

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