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昆蟲組蛋白提取試劑盒

簡要描述:產品概述 product description 貝博® BBproExtra®昆蟲組蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲組織樣本中提取組蛋白。提取過程簡單方便。 組蛋白提取產物的產量大約0.4 mg 每107 個細胞或100 mg 組織,不同的細胞和組織中,產量差異很大。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、組蛋白修飾實驗比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。 貝博® BBproExtra® 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-12-21
  • 訪  問  量:308

詳細介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
昆蟲
產品特點
1.使用方便,從細胞,組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2.含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
3.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項:
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過程保持低溫操作,縮短離心時間。
使用方法

細胞組蛋白提取:
1. 提取液制備:
每500ul蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。
2. 收集5-10×106個細胞,在4℃,1000×g條件下離心5-10分鐘,吸干上清,收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5-10×106個細胞中加入500ul蛋白提取液A,混勻后,在4℃條件下輕輕振蕩20-30分鐘。
5. 在4℃,16000×g條件下離心15分鐘,棄上清。
6. 沉淀中加入100ul組蛋白提取液B。
7. 用200ul槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。
8. 置4℃冰箱過夜存放。
9. 16000×g條件下離心10分鐘,收集上清。
10. 在上清中加入10-25ul 試劑C充分混勻。
11. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸,分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

組織組蛋白提取:
1. 提取液制備:
每500ul蛋白提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎,加入500ul蛋白提取液A,用組織勻漿器/勻漿機充分勻漿至無明顯大塊固體。
3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中,在4℃條件下輕輕振蕩20-30分鐘。
4. 在4℃,16000×g條件下離心15分鐘,棄上清。
5. 沉淀中加入100ul組蛋白提取液B。
6. 用200ul槍頭反復吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻,置4℃冰箱過夜存放。
7. 16000×g條件下離心10分鐘,收集上清。
8. 在上清中加入25ul 試劑C充分混勻。
9. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸,分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

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