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SDS裂解液

簡要描述:產品概述 product description 貝博SDS裂解液采用優質原料配制,對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用,是經典常用的細胞組織快速裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。 貝博SDS裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-12-21
  • 訪  問  量:306

詳細介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期
1年
檢測方法
WB、IP等
適用樣本
細胞、組織
產品應用
WB、IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器
試劑準備
1.PBS緩沖液 (pH7.4,實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套
使用注意事項
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
2.實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測,提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過程保持低溫操作,縮短離心時間。
使用方法
A. 細胞裂解
1. 裂解液制備:每1ml冷的SDS裂解液中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細胞,在4℃,1000rpm條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養基,盡可能吸干,收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液(每106個細胞加100ul SDS裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul,或一個75 cm2培養瓶加1~2 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果SDS裂解液不足量,細胞裂解效率將會降低),混勻后,在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃,14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管,用于下游實驗。

B. 組織裂解
1. 裂解液制備:每1ml冷的SDS裂解液加入4ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎,加入1ml裂解液,用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中,在4℃,10000rpm條件下離心5分鐘。
4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存備用。

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